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Native Agarose-Gelelektrophorese

Restringierte Plasmide wurden nach Sambrook et al. (1989) mit nativer Agarose-Gelelektrophorese analysiert. Dafür verwendet wurde eine Minigel-Apparatur der Firma BIO-RAD (Modell MINI SUB DNA CELL).

Agarose-Gellösung: 0,8 % Agarose
  1x TAE-Puffer
  0,5 $ \mu$ g/ml Ethidium-Bromid
    ad 45ml mit H2O Milli - Q
Elektrophoresepuffer: 1x TAE
Probenauftragspuffer: 40 % Glycerin
  0,4x TAE
  0,02 % Bromphenolblau und Xylencyanolblau FF

Die Elektrophorese erfolgte für 2-3 Stunden bei 60V. Durch die Zugabe von Ethidium-Bromid zur Gellösung war die Detektion der DNA-Moleküle auf einem UV-Transluminator (UVT 2035; Herolab, St.Leon) mit einer Wellenlänge von 302 nm gleich im Anschluß an den Gellauf möglich. Die Agarose-Minigele wurden dann mit einer Kamera der Firma Polaroid (Modell MP-4 Land Camera; Massachusetts, USA) fotografiert.



S. Gräf